Introduction This study assessed the viability of the rabies virus in the argasid tick Carios fonsecai following experimental infection. Methods The mouse inoculation test (MIT), fluorescent antibody test (FAT) and polymerase chain reaction (PCR) were used. The rabies virus was administered to ticks via the intra-coelomic route, and the ticks were sacrificed at different time points. Results The inoculated ticks were negative for rabies according to the MIT. Ticks macerated with rabies virus were positive according to the MIT and FAT. All of the tick lots tested by PCR were positive. Conclusions The rabies virus became unviable shortly after its inoculation into tick bodies. Ticks are not likely to play an important role in the epidemiology of rabies.

INTRODUÇÃO: A raiva é uma importante zoonose responsável por milhares de mortes anualmente em todo o mundo. Embora o ciclo silvestre, onde os cães são os principais transmissores esteja controlado no Brasil, o ciclo aéreo, onde o morcego hematófago Desmodus rotundus é o principal transmissor e diversas espécies de morcegos não hematófagos podem se infectar e transmitir o vírus, permanence como um importante problema econômico e de saúde pública. MÉTODOS: O objetivo deste trabalho foi a caracterização antigênica por meio da utilização de anticorpos monoclonais e a caracterização genética por meio da reação em cadeia pela polimerase pela transcriptase reversa seguida de análise filogenética em morcegos não hematófagos e animais domésticos herbívoros provenientes da região oeste do Estado de São Paulo. RESULTADOS: A análise antigênica de 27 amostras determinou três variantes distintas: Agv-3, AgV-4 e AgV-6; a análise genética de 29 amostras identificou 5 diferentes grupos, todos pertencentes a espécie Rabies virus. CONCLUSÕES: Ainda que apenas amostras de morcegos não hematófagos tenham sido analisadas, a maioria das variantes antigênicas e genéticas identificadas na região estava relacionada com a variante mantida pelos morcegos hematófagos Desmodus rotundus. Amostras de uma mesma variante antigênica segregaram em mais de um clado genético. Este estudo demonstrou a diversidade de linhagens genéticas do vírus da raiva presentes e circulantes em morcegos não hematófagos na região estudada.

INTRODUCTION: Rabies is an important zoonosis that causes thousands of deaths worldwide each year. Although the terrestrial cycle, mainly transmitted by dogs, is controlled in Brazil, the aerial cycle remains a serious public health issue, besides the economic problem. In the aerial cycle, the haematophagous bat Desmodus rotundus is the main source of infection, where several different species of non-haematophagous bats can be infected and can transmit the virus. METHODS: The aim of this work was to study the epidemiological pattern of rabies using antigenic characterization with monoclonal antibodies and genetic characterization by reverse-transcriptase polymerase chain reaction followed by sequencing and phylogenetic analysis of non-haematophagous bats' and herbivorous animals' central nervous system samples from the western region of the State of São Paulo, Brazil. RESULTS: From 27 samples, 3 antigenic variants were identified: AgV-3, AgV-4, and AgV-6; and from 29 samples, 5 different clusters were identified, all belonging to the rabies virus species. CONCLUSIONS: Although only non-haematophagous bats were evaluated in the studied region, the majority of samples were from antigenic and genetic variants related to haematophagous bats Desmodus rotundus. Samples from the same antigenic variant were segregated in more than one genetic cluster. This study demonstrated the diversity of rabies virus genetic lineages presented and circulating in non-haematophagous bats in the studied region.

INTRODUÇÃO: O laboratório do Pólo da Alta Sorocabana de Presidente Prudente, SP, em parceria com outras instituições de pesquisa, realizou estudos pertinentes aos morcegos da região oeste do Estado de São Paulo, Brasil. Para tal, foram pesquisadas algumas situações, tais como: a) isolamento do vírus rábico, no período 2006 a 2008; b) as respectivas variantes antigênicas; c) abrigos diurnos do morcego hematófago Desmodus rotundus. MÉTODOS: As amostras para exame foram provenientes de morcegos não hematófagos encaminhadas ao laboratório sendo submetidas aos testes de imunofluorescência direta e prova biológica. As amostras positivas foram caracterizadas antigenicamente por meio do teste de anticorpos monoclonais. Quanto aos morcegos, foram identificados e classificados, e também foi realizado mapeamento de abrigos dos mesmos. RESULTADOS: O laboratório recebeu 1.113 morcegos não hematófagos para diagnóstico laboratorial, sendo 11 (1%) deles positivos, e dentre as amostras positivas, 5 (45,5%) delas tiveram variante antigênica 3 associada ao morcego D. rotundus e 4 (36,5%) foram compatíveis com amostras de morcegos insetívoros. Foram pesquisados 16 abrigos de morcegos hematófagos e observou-se a presença de outras 3 espécies de morcegos não hematófagos convivendo com eles. CONCLUSÕES: Os experimentos mostraram que o vírus rábico continua circulando na região com pelo menos 3 variantes antigênicas, e que, a coabitação de morcegos hematófagos com não hematófagos pode ter alguma relação com a disseminação do vírus rábico.

INTRODUCTION: The Polo da Alta Sorocabana Laboratory in Presidente Prudente, SP, in partnership with other research institutions, conducted studies related to bats from the western region of the State of Sao Paulo, Brazil. Thus, certain situations were investigated, including: a) isolation of the rabies virus from 2006 to 2008; b) identification of respective antigenic variants; and c) characterization of daytime shelters of Desmodus rotundus vampire bats. METHODS: Samples for examination originated from nonhematophagous bats forwarded to the laboratory and subjected to direct fluorescent antibody test and mouse inoculation test. Positive samples were characterized by the monoclonal antibody test. Regarding the bats, they were identified and classified and mapping of their shelters was also performed. RESULTS: The laboratory received 1,113 nonhematophagous bats for rabies diagnosis, 11 (1%) of which were positives, and among the positive samples, 5 (45.5%) presented antigenic variant 3 (from the bat Desmodus rotundus) and 4 (36.5%) were compatible with samples derived from Brazilian insectivorous bats. Sixteen vampire bat shelters were investigated and observation confirmed the presence of another 3 species of nonhematophagous bats coexisting with them. CONCLUSIONS: The experiments showed that at least 3 antigenic variants of rabies virus are circulating in the region and that the cohabitation of vampire bats with nonhematophagous bats could be related to the dissemination of the rabies virus.

INTRODUÇÃO: Esse trabalho apresenta o primeiro registro de raiva em três espécies de morcegos: Molossus molossus, Molossops neglectus e Myotis riparius na Cidade de São Paulo, Brasil. MÉTODOS: Os morcegos foram diagnosticados como positivos para raiva usando as técnicas padrão de imunofluorescência direta e o teste de inoculação em camundongo. Os isolados foram caracterizados antigenicamente usando um painel de oito anticorpos monoclonais (CDC/Atlanta/USA). As amostras também foram analisadas geneticamente por sequenciamento parcial do gene da nucleoproteína entre as posições 1157 e 1445nt. RESULTADOS: O resultado das análises mostrou que as amostras isoladas da espécie M. molossus apresentou variante antigênica 6, enquanto as outras duas amostras mostraram um perfil diferente daquele estabelecido no painel e ainda não registrado em literatura. Os resultados da analise genética revelaram que a amostra de M. molossus segrega com isolados de Lasiurus sp., M. neglectus segrega com o isolado do subgrupo de Eptesicus furinalis e uma amostra de M. riparius segrega com isolados de Myotis sp. CONCLUSÕES: Os casos relatados neste estudo enfatizam a necessidade do esclarecimento da ocorrência de casos de raiva em morcegos, principalmente em áreas urbanas.

INTRODUCTION: This paper presents the first report of rabies in three bat species, Molossus molossus, Molossops neglectus and Myotis riparius in the city of São Paulo, Brazil. METHODS: Bats were diagnosed as positive for rabies using the fluorescent antibody test and mouse inoculation test. The isolates were characterized antigenically using a panel of eight monoclonal antibodies. The samples were also genetically analyzed by partial sequencing of the portion of nucleoprotein gene between positions 1157 and 1445nt. RESULTS: Analysis of the results verified that the sample isolated from the species M. molossus presented antigenic variant 6, while the other two samples showed a different profile from that established in the panel, one not previously reported in the literature. The results of genetic analysis revealed that the M. molossus sample segregated with Lasiurus sp. isolates, M. neglectus segregated with a subgroup of Eptesicus furinalis isolates and the Myotis riparius sample segregated with Myotis sp. isolates. CONCLUSIONS: The cases reported in this paper emphasize the need for clarification of the circumstances in which cases of rabies in wildlife occur, principally in urban areas.

Using the monoclonal antibody technique, the Clinical and Molecular Virology Laboratory of the Institute of Biomedical Sciences of the University of São Paulo typed 18 rabies virus samples from non-hematophagous bats of several species from the region of Presidente Prudente, SP, Brazil. Among these samples, 15 (82.3%) were defined as variant 3 (compatible with samples isolated from Desmodus rotundus bats) and three (16.7%) as variant 4 (compatible with samples isolated from Tadarida brasiliensis bats).

O Laboratório de Virologia Clínica e Molecular do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo, utilizando-se da técnica de anticorpos monoclonais, tipificou 18 amostras de vírus rábico provenientes de morcegos não hematófagos de várias espécies provenientes da Região de Presidente Prudente, SP, Brasil. Destas amostras, 15 (82,3%) foram definidas como variante 3 (compatível com amostras isoladas de morcegos Desmodus rotundus) e 3 (16,7%) como variante 4 (compatível com amostras isoladas de morcegos Tadarida brasiliensis).

Amostras de vírus rábico isoladas de animais e humanos no período de 1989 a 2000 foram tipificadas antigenicamente com a utilização de um painel de anticorpos monoclonais contra a nucleoproteína viral, pré-estabelecido para o estudo da epidemiologia molecular do vírus rábico isolado nas Américas. As amostras testadas foram isoladas no laboratório de diagnóstico do Instituto Pasteur e outros centros de diagnóstico de raiva no Brasil. Além das cepas de vírus rábico fixo CVS-31/96-IP, mantida em cérebro de camundongos e a PV-BHK/97, mantida em cultura de células, cepas de vírus rábico isoladas de cães, gatos, bovinos, eqüinos, morcegos, ovinos, caprino, suínos, raposa, sagüí, coatí, guaxinim e humanos, totalizaram 330 amostras. Seis variantes antigênicas foram definidas, compatíveis com perfís observados no painel de anticorpos monoclonais pré-estabelecido utilizado, as de número 2 (cão), 3 (Desmodus rotundus), 4 (Tadarida brasiliensis), 5 (Vampiro da Venezuela), 6 (Lasiurus cinereus) e Lab (reagente a todos os anticorpos utilizados), além de outros seis perfís desconhecidos, não compatíveis com aqueles observados no painel utilizado. A maior variabilidade foi observada entre as amostras isoladas de morcegos insetívoros e a variante mais comum isolada entre as espécies foi a variante 3 (Desmodus rotundus). Estes fatos podem representar a existência de múltiplos ciclos de transmissão independentes, envolvendo diferentes espécies de morcegos.

Animal and human rabies samples isolated between 1989 and 2000 were typified by means of a monoclonal antibody panel against the viral nucleoprotein. The panel had been previously established to study the molecular epidemiology of rabies virus in the Americas. Samples were isolated in the Diagnostic Laboratory of the Pasteur Institute and in other rabies diagnostic centers in Brazil. In addition to the fixed virus samples CVS-31/96-IP, preserved in mouse brain, and PV-BHK/97, preserved in cell culture, a total of 330 rabies virus samples were isolated from dogs, cats, cattle, horses, bats, sheep, goat, swine, foxes, marmosets, coati and humans. Six antigenic variants that were compatible with the pre-established monoclonal antibodies panel were defined: numbers 2 (dog), 3 (Desmodus rotundus), 4 (Tadarida brasiliensis), 5 (vampire bat from Venezuela), 6 (Lasiurus cinereus) and Lab (reacted to all used antibodies). Six unknown profiles, not compatible with the panel, were also found. Samples isolated from insectivore bats showed the greatest variability and the most commonly isolated variant was variant-3 (Desmodus rotundus). These findings may be related to the existence of multiple independent transmission cycles, involving different bat species.

O objetivo do presente trabalho foi estudar um novo esquema de vacinação anti-rábica humana, com um menor número de doses, administradas em dias não consecutivos (5 doses nos dias 0, 4, 7, 20 e 35). A avaliação da resposta imune humoral foi feita pela prova de soroneutralização e pela reação de imunofluorescência indireta, enquanto que a resposta imune celular foi avaliada pela transformação linfoblástica em cultura de sangue total e pelo teste cutâneo de leitura tardia. Foram estudados um total de 35 voluntários, submetidos ao esquema reduzido de vacinação, e os resultados encontrados permitem afirmar que, embora o número de casos seja relativamente pequeno, este novo esquema de vacinação mostrou-se capaz de induzir a produção de imunoglobulinas anti-rábicas, bem como de eli-citar a resposta imune celular ao antígeno rábico.

The present study evaluates the humoral and cellular immune responses in 35 volunteers submited to short antirabies vaccination schedules with the Fuenzalida & Palacios vaccine based on the administration of doses on non consecutive days. The volunteers were divided into two groups. The first group received a total number of five doses given on days 0, 4, 7, 20 and 35. The other group received four doses, the first one being a double dose given on day 0 and than three other single doses on days 7, 20 and 35. The evaluation of humoral immune response was carried out by serum neutralization (SN) and indirect immunofluorescense (IIF) tests, while the cellular immune response was evaluated by lymphoblastic transformation assay (LTA) and skin test (ST). According to our results these reduced schedules elicited early and effective humoral and cellulafimmune responses to rabies antigen suggesting that new reduced schedules should be extensively studied in order to give the proper bases to the proposition of changes in the current long-term schedule.

Os autores compulsaram dados epidemiológicos a respeito de agressão por roedores no período de 1976 a 1985, nos registros do Instituto Pasteur de São Paulo (Brasil). Observaram que de 367 379 pessoas agredidas, 22 250 foram vítimas de roedores. Os roedores mais implicados nesses acidentes foram os urbanos, sendo que a captura foi um fator limitante para o envio de amostras ao laboratório. O diagnóstico laboratorial realizado em 1083 amostras de roedores não revelou nenhum caso positivo no período, embora a raiva estivesse presente em outras espécies animais. Concluem que, sendo a raiva rara entre os roedores, é necessário que se realizem provas de identificação do vírus quando houver suspeita de caso positivo; e que, não existindo casos relatados de óbitos humanos por raiva relacionados a roedores, existe a possibilidade de redução dos tratamentos anti-rábico pós-exposição a estes animais.

The authors looked over the epidemiological data on the aggression by rodents in the period 1976-1985 in the records of the Instituto Pasteur in the State of São Paulo (Brazil). They observed that out of 367 379 people attacked, 22 250 were victims of rodents. Mainly responsible for these accidents were urban rodents, whose capture, however, was a limiting factor for the sending of samples to the laboratory. Laboratory diagnosis carried out in 1 083 samples of rodents did not show any positive case in the period, in spite of the presence of rabies in other animals species. It is conclude that, as rabies is rare among rodents, tests are necessary for the identification of the virus whenever suspicion of a positive case occurs; in addition, in the absence of reported cases of human death caused by rabies related to rodents, possibility exists for a reduction of antirabies treatments following exposure to these animals.

São apresentados os resultados do emprego de esquema de vacinação anti-rábida humana pré-exposição, constituído de 3 doses de vacina tipo Fuenzalida-Palacios administradas a 165 pacientes em dias alternados, mais uma dose de reforço no 30.° dia após a dose inicial. Os títulos de anticorpos foram determinados por prova de soroneutralização em amostras de sangue colhidas antes, 30 e 40 dias após administração da primeira dose. Verificou-se que no 30.° dia, 74,6% dos pacientes apresentaram anticorpos neutralizantes no soro, valor que se elevou a 98,1% no quadragésimo dia, o que mostra a eficácia do esquema em relação à resposta imunitária em tempo relativamente curto e a importância da dose de reforço como estímulo à produção de anticorpos. Nos pacientes submetidos às doses anuais de reforço num período de 10 anos, verificou-se aumento gradual da presença de anticorpos antes da administração da dose de reforço subseqüente, até atingir valores de 100%. Face aos resultados obtidos foi sugerido que as doses de reforço sejam administradas a intervalos de tempo maiores e precedidas da titulagem de anticorpos a fim de se avaliar da necessidade ou não de sua administração.

A reduced schedule for a pre-exposure anti-rabic immunization, of humans with 3 doses of 1 ml of Fuenzalida-Palacios type vaccine administered on alternate days, plus one booster 30 days after the first dose, was related. The blood samples were collected on the 0, 30th and 40th day after the first vaccine dose and the antibody titration was performed by serum neutralizing test. It was observed that 74,6% of the patients presented serum neutralizing antibodies on the 30th day and 98.1% on the 40th day, demonstrating the efficacy of this reduced schedule in stimulating the antibody response in a short time. The importance of a booster dose was emphasized. In the patients submitted to annual boosters over a period of 10 years, a gradual increase in the number of patients with anti-rabic antibodies before the subsequent booster dose was observed, reaching the level of 100% in the 9th year. It was suggested that the booster doses be administered at longer intervals and after antibody titration in order to evaluate the need for the administration of the booster dose.

São apresentados os resultados do emprego de esquema de vacinação anti-rábida humana pré-exposição, constituído de 3 doses de vacina tipo Fuenzalida-Palacios administradas a 165 pacientes em dias alternados, mais uma dose de reforço no 30.° dia após a dose inicial. Os títulos de anticorpos foram determinados por prova de soroneutralização em amostras de sangue colhidas antes, 30 e 40 dias após administração da primeira dose. Verificou-se que no 30.° dia, 74,6% dos pacientes apresentaram anticorpos neutralizantes no soro, valor que se elevou a 98,1% no quadragésimo dia, o que mostra a eficácia do esquema em relação à resposta imunitária em tempo relativamente curto e a importância da dose de reforço como estímulo à produção de anticorpos. Nos pacientes submetidos às doses anuais de reforço num período de 10 anos, verificou-se aumento gradual da presença de anticorpos antes da administração da dose de reforço subseqüente, até atingir valores de 100%. Face aos resultados obtidos foi sugerido que as doses de reforço sejam administradas a intervalos de tempo maiores e precedidas da titulagem de anticorpos a fim de se avaliar da necessidade ou não de sua administração.

A reduced schedule for a pre-exposure anti-rabic immunization, of humans with 3 doses of 1 ml of Fuenzalida-Palacios type vaccine administered on alternate days, plus one booster 30 days after the first dose, was related. The blood samples were collected on the 0, 30th and 40th day after the first vaccine dose and the antibody titration was performed by serum neutralizing test. It was observed that 74,6% of the patients presented serum neutralizing antibodies on the 30th day and 98.1% on the 40th day, demonstrating the efficacy of this reduced schedule in stimulating the antibody response in a short time. The importance of a booster dose was emphasized. In the patients submitted to annual boosters over a period of 10 years, a gradual increase in the number of patients with anti-rabic antibodies before the subsequent booster dose was observed, reaching the level of 100% in the 9th year. It was suggested that the booster doses be administered at longer intervals and after antibody titration in order to evaluate the need for the administration of the booster dose.